在CD3/CD28抗体的刺激下，PBMC在生长过程中体积变大。因为大体积细胞需要电压较低，所以刺激培养的T细胞电转需要的电压比新鲜的PBMC低很多。

       我们注意到不同实验室培养的T细胞电转所需要的电压会有些差别。原因可能是培养液品牌不一样，或者CD3/CD28抗体和IL-2的浓度和其他培养条件有区别。为了达到高效率转染并且保持细胞良好的生长活性，细胞刺激时间以及电转的电压需要经过仔细测试。

       转座子表达特别注意：我们测试了一套sleeping beauty转座子表达系统，发现这套系统在刺激培养的T细胞里面表达CAR效率很低，而在新鲜的PBMC里面表达CAR效率非常高。假如您在使用sleeping beauty或者piggybac这些转座子系统并且发现培养的T细胞里面表达效率低，建议尝试新鲜的PBMC细胞。