Celetrix Electroporation

全新高效细胞电转仪

T cell, cultured or stimulated

在CD3/CD28抗体的刺激下,PBMC在生长过程中体积变大。因为大体积细胞需要电压较低,所以刺激培养的T细胞电转需要的电压比新鲜的PBMC低很多。

我们注意到不同实验室培养的T细胞电转所需要的电压会有些差别。原因可能是培养液品牌不一样,或者CD3/CD28抗体和IL-2的浓度和其他培养条件有区别。为了达到高效率转染并且保持细胞良好的生长活性,电转的电压必须经过仔细测试。我们推荐电转脉冲时间为20ms,而不是普通细胞系使用的30ms。

转座子表达特别注意:我们测试了一套sleeping beauty转座子表达系统,发现这套系统在刺激培养的T细胞里面表达CAR效率很低,而在新鲜的PBMC里面表达CAR效率非常高。假如您在使用sleeping beauty或者piggybac这些转座子系统并且发现培养的T细胞里面表达效率低,建议尝试新鲜的PBMC细胞。

T cell
Cell Line模式-细胞电转推荐参数
     细胞量:2*106细胞/20ul;1.0*107细胞/100ul

     质粒量:20ul:2ug;100ul:10ug(试剂盒纯化)

     电转液:Celetrix专用电转液

     电转温度:室温

     电转后培养液:PEM-2+CD3/CD28/IL2      

     电转条件:480V-540