Celetrix Electroporation

全新高效细胞电转仪

NK细胞电转:原代NK和刺激培养NK细胞电转

          在电转条件上,原代纯化的NK细胞和PBMC电转比较类似。这些细胞在未刺激培养时,直径比较小,只有7-8um,电转需要的电压比普通细胞系高很多,可以直接参照PBMC的电转条件进行操作。

       刺激培养的NK的细胞在生长过程中体积会变大。因为大体积细胞需要电压较低,所以刺激培养的NK细胞电转需要的电压会比原代NK细胞低很多,和普通细胞系电转电压类似,使用Cell line模式电转即可。

     我们测试了不同的NK细胞刺激培养方案,目前表现比较好的是加Feeder cell培养,比液体培养基的好一些。刺激培养6天的NK细胞电转GFP转座子后再培养8天,GFP阳性率可以维持在50%。不同刺激培养条件的NK细胞,为了达到高效率转染并且保持细胞良好的生长活性,细胞刺激时间以及电转的电压都需要经过仔细测试。

NK参数推荐图 1.png
NK参数推荐图 2.png
刺激培养NK细胞电转推荐参数-20ul

  细胞量:1-2*10^6细胞

  质粒量:2ug(试剂盒纯化)

  电转液:Celetrix专用电转液

  电转后培养液: 无抗生素NK细胞培养基

  电转条件:Cell Line模式 480V-520V

刺激培养NK细胞电转推荐参数-100ul

  细胞量:5-10*10^6细胞

  质粒量:10ug(试剂盒纯化)

  电转液:Celetrix专用电转液

  电转后培养液: 无抗生素NK细胞培养基

  电转条件:Cell Line模式 480V-520V